دراسة الصفات الشكلية والتباينات الجسمية الوراثية في مزارع الكالوس لنبات الونكا (Catharanthus roseus L.)

الملخص

         نُفذت التجربة في الهيئة العامة للتقانة الحيوية في سورية، خلال الفترة 2019-2021، لمعرفة تأثير الإجهادات اللاإحيائية في الوزن الرطب والجاف للكالوس، والكشف عن التباينات الجسمية الوراثية الحاصلة في مزارع الكالوس المجهد حلولياً وملحياً ومقارنتها مع النبات المحلي والنبات النامي في الزجاج In Vitro، وذلك باستخدام تقنية التكرارات الترادفية البينية البسيطةISSR  (Inter Simple Sequence Repeats) باستعمال 21 مرئسة. عُقمت البذور بمحلول هيبوكلوريد الصوديوم NaOCl (0.5%)، وزرعت على الوسط المغذي MS، وبعد نجاح الزراعات التأسيسية، نُقلت النبيتات إلى وسط الإكثار المدعم بالأكسينات NAA (1 مغ.ل^-1) والسيتوكينياتBA  (2 مغ.ل^-1). تمّ استحداث الكالوس من أوراق نبات الونكا باستعمال وسط MS المدعم بـكلٍ منNAA  وKin ، وانتخبت أفضل توليفة هرمونية كشاهد لتجارب البحث اللاحقة. تمَّ تعريض الكالوس لمستوياتٍ متزايدة بشكل تدريجي من الإجهاد الحلولي المُصطنع بإضافة سكر البولي إيثيلين جلايكولPEG-6000 ، والملحي NaCl  بواقع مستوى أعلى كل 35 يوماً. أظهرت النتائج أنَّ متوسط الوزن الرطب والجاف للكالوس الأدنى معنوياً في المعاملة 100mM  NaCl (3.047، 0.250 غ على التوالي)، وفي المعاملة -0.4 Mpa (2.35، 0.18 غ على التوالي)، بينما كان الأعلى معنوياً في الشاهد (بدون إجهاد) (6.207، 0.483 غ). أثبتت نتائج الدراسة الجزيئية فعّالية جميع المرئسات المستعملة (21 مرئسة) في إعطاء تعددية شكلية بين العينات المدروسة، وأظهر التحليل العنقودي انفصال النبات النامي في الزجاج عن الكالوس الناتج عنه، مما يؤكد أن مزارع الكالوس مصدراً مهماً للاختلافات الوراثية وأن تقنية ISSR أداة فعالة للكشف عن هذه الاختلافات.